| Dr. Alberto Aranda Yus (1)
Obtención y preservación de la membrana amnióticaObtención Las placentas se obtienen de partos controlados mediante cesárea electiva. Previamente a la obtención del tejido se ha obtenido el consentimiento informado autorizando la donación. Selección de la donante El protocolo de selección de las donantes de MA sigue las mismas evaluaciones que los donantes de órganos y tejidos para trasplante, siendo criterios de exclusión específicos:
Desde el momento de la extracción hasta su llegada al centro de procesamiento el tejido debe permanecer en frío, con una oscilación de temperatura entre 2 y 8ºC. El tejido debe acompañarse de un tubo de sangre de la madre para la realización de controles serológicos.
Al tratarse de un donante vivo es necesario cubrir el periodo ventana de estas enfermedades. Por ello se debe realizar el estudio de la donante en el momento del parto y con posterioridad, esperando un mínimo de 3 meses si utilizamos serologías, o un mínimo de 10 días si el método utilizado es la PCR. El envío de la placenta al centro de procesamiento debe ser lo más rápido posible, siendo el tiempo límite de 24 horas (Fotos 1 y 2).
Procesamiento Una vez obtenida la placenta se procede a su lavado bajo condiciones de flujo laminar con suero fisiológico estéril solo o con la adición de un combinado de antibióticos: penicilina (50 μg/ml), estreptomicina (50 μg/ml) neomicina (100 μg/ml) y anfotericina B (100 μg/ml). Posteriormente, el amnios es separado del resto del corion mediante disección roma (foto 3) y tendido sobre un papel de nitrocelulosa con la superficie correspondiente al epitelio y la membrana basal hacia la parte superior. A continuación se procede a recortar el papel con la membrana amniótica adherida en discos de 3 x 4 cm que son almacenados a –80ºC en placas de Petri estériles con glicerol y medio de Eagle modificado por Dulbecco (DMEM) al 50 % (Foto 4.)
De esta manera podemos conservar la MA congelada y disponible para su uso durante un mínimo de 12 meses, aunque probablemente sea viable con garantías durante más tiempo. Para utilizarla basta con extraerla del congelador 10-15 minutos antes de la cirugía, ya que en poco tiempo se produce la descongelación a temperatura ambiente. |
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